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L-天门冬氨酸合成

规格:99%
包装:25kg/桶
最小购量:1
CAS:56-84-8
分子式:C4H7NO4
分子量:133.1

L-天冬氨酸(cas56-84-8)主要用酶法生产。用L-天冬氨酸酶作用于延胡索酸(反丁二酸)和氨,即生成L-天冬氨酸。

菌种培养 大肠杆菌 (Eschrichia coli)Asl.881的培养。普通肉汁培养基为斜面培养基,插瓶培养基其组成为:玉米浆7.5%,延胡索酸2.0%,MgSO4·7H2O 0.02%将溶液用氨水调pH至6.0,煮沸过滤后,与500ml锥形瓶中装入培养基50-100ml。 取新鲜斜面上或液体中的培养种子,接种与摇瓶培养基中,于37℃下振摇培养24h,逐级扩大培养至1000-2000L规模后,用1mol/L的HCl调pH至5.0,保温45℃ 1h 后,冷却至室温,于转筒式高速离心机内离心,收集含有天冬氨酸酶的菌体。

固定化天冬氨酸酶,制成生物反应器取E.Coli湿菌体20kg,悬浮于离心后的培养清液80L中(或80L生理盐水),保温40℃再加入90L保温40℃的12%明胶溶液和1.0%的戊二醛溶液,充分搅匀后,放置冷却凝固,再放人0.25%戊二醛溶液中浸泡,于5℃过夜后,再切成3-5 mm3大小的小块,并将其浸泡在0.25%戊二醛溶液中5℃过夜,再取出以蒸馏水洗涤,滤干,得含天冬氨酸酶的固定化E.Coli, 将其装填到填充式生物反应器中,备用。

转化 取保温37℃的1 mol/L延胡索酸铵(含1mmol/L MgCl2,pH8.5)底物的溶液,以一定的空间速度(SV)连续流过生物反应器,控制最大转化率大于95%,得转化液。

制取粗品及精制 将转化液渐加入1 mol/L的HCl,调pH至2.8,在保持5℃下放置过夜结晶, 滤取结晶, 用水洗涤,滤干, 于105℃干燥,得L-天冬氨酸粗品。再将粗品用稀氨水重结晶,先以氨水溶解成15%的溶液 (pH5.0)再加入1%活性炭,加热70℃搅拌脱色1h后, 趁热过滤去渣,取滤液冷却, 保温5℃过夜结晶, 过滤取结晶, 85℃真空干燥,即得L-天冬氨酸成品。
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