吡唑-巴比妥酸分光光度法
1 应用范围
1.1 本法适用于测定生活饮用水及其水源水中游离氰及部分络合氰化物的含量。
1.2 本法最低检测量为0.1μg。若取250ml水样蒸馏测定， 则最低检测浓度为0.002mg／L。
2 原理
水样中氰化物经蒸馏后吸收于碱性溶液中，与氯胺T伐应生成氯化氰， 然后与吡唑－巴比妥酸生成紫色染料，比色定量。
3 仪器
3.1 500ml全玻璃蒸馏器。
3.2 25ml具塞比色管和50ml具塞比色管。
3.3 恒温水浴。
9.4 分光光度计。
4 试剂
4.1 氰化物标准溶液：1.00ml含1.00mg氰化物（CN-）。同21.1.4.1。
4.2 氢氧化钠溶液（0.25mol／L及0.025mol／L）。
4.3 0.5mol乙酸溶液：取3ml冰乙酸，用纯水稀释至100ml。
4.4 磷酸盐缓冲液：称取2.79g水磷酸二氢钾（KH2PO4）和4.L4 g无水磷酸氢二钠（ Na2HPO4），溶于纯水中，并稀释至1000ml。
4.5.0.1％酚酞溶液：同21.1.4.8。
4.6 1 ％氯胺T溶液：同21.1.4.11。
4.7 吡唑－巴比妥酸试剂：称取0 . 36 g巴比妥酸（丙二酰脲， C4H4O3H2），加入6ml吡啶（C5H5N）及20ml 1＋ 3 盐酸， 待溶解后加纯水稀释至100ml。
5 步骤
5.1 取250ml水样，按21.1.5.1步骤进行蒸馏，取10.0ml 蒸馏液，置于25ml比色管中。
5.2 另取25ml具塞比色管9支，分别加入氰化钾标准溶液（4.1）0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50及2.00ml，加0. 025mol／L氢氧化钠溶液（4.2）至10.0ml。
5.3 向水样及标准管中各加1滴酚酞指示剂，用0.5mol／L乙酸溶液（4.3）调至红色刚好消失。
注：氯化氰的形成与pH值有关，溶液酸性时氰化物不稳定；碱性时活性氯形成的次氯酸盐能分解氰化物，实验证明，在加氯胺T前溶液的pH值在5～7 之间为宜。
5.4 向水样及标准系列管中各加5.0ml磷酸盐缓冲溶液（4.4），混匀。加入0.25ml氯胺T溶液（2L.2.4.6），混匀。加入2.5ml 吡唑－巴比妥酸试剂（4.7），混匀。加蒸馏水到25ml刻度，充分混匀。
5.5 将上述比色管中于40℃水浴中放置30min， 取出， 冷至室温， 于585nm波长下，用3 cm比色皿，以纯水作参比，测定吸光度。氯化物与吡啶-巴比妥酸反应达到稳定的最大吸光度时间与溶液温度有关，35～40℃后时需2Omin；25 ～30℃需30min； 6～10℃需60min。
5.6 绘制校准弗线，从曲线上查出样品管中氯化物含量。
6计算
C＝M/V1×V2/V3 ...............................(53)
式中：C───水样中氰化物（CN-）浓度，mg／L；
M───从校准曲线上查得样品管中氰化物的含量，μg
V1───最初水样体积，ml；
V2───蒸馏液总体积，ml；
V3───色所用蒸馏液体积，ml。