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胆红素合成

非售品
CAS:635-65-4
分子式:C33H36N4O6
分子量:584.7

方法一、钙盐间接提取法钙盐的制备新鲜猪胆汁,在搅拌下加3-3.5倍量饱和石灰水上清液,加完后继续搅拌5-10min,Ph11-12,加热至50℃时出现的泡沫用纱布除去,继续加热至沸,保持2min,冷却,过滤,得钙盐。胆红素成品的制备取钙盐加0.8倍量水调成糊状,过30-40目筛,滤液中加0.3%抗氧化剂,加盐酸调pH1.5,静置4h,过滤,滤饼加8-10倍量80%乙醇捣碎混匀,加抗氧化剂,静置过夜,得沉淀物。加4-6倍量80%以上的乙醇和抗氧化剂,搅拌后浸泡过夜,如此操作3-4次,将沉淀物70℃以下干燥,得胆红素成品。钙盐沉淀[HCl,偏重亚硫酸钠]→沉淀[乙醇,偏重亚硫酸钠]→沉淀物[70℃]→胆红素成品。


方法二、改进的钙盐-氯仿提取法胆红素钙盐的制备新鲜猪胆汁加氢氧化钠调pH12,加热至沸,加氯化钙溶液,再加热至沸,冷却,过滤,得胆红素钙盐。猪胆汁[NaOH,CaCl2]→[pH12,100℃]胆红素钙盐胆红素成品的制备胆红素钙盐加1:1盐酸调pH1-2,沥去酸水,加氯仿提取,再蒸去氯仿,加无水乙醇洗涤,溶液放置约5℃,得胆红素成品。胆红素钙盐[HCl]→[pH1-2]酸化物[氯仿,无水乙醇]→[5℃]胆红素成品。


方法三、改进的钙盐法制钙盐,酸化取新鲜猪胆汁加1%氢氧化钙,搅匀,迅速加热至90-97℃,保温10min,过滤得钙盐。加热至40℃即出现油脂物可轻轻除去。所得钙盐可用热水冲洗一次,除去过量的碱和其他杂质。取钙盐加10倍量以上水使均匀分散,加1%抗氧化剂,搅拌下(60r/min)滴加1:2盐酸。40min内达pH2.0,pH不变为止,得酸化物。


猪胆汁[1%氢氧化钙]→[90-97℃,15min]胆钙盐[抗氧剂,盐酸]→[pH2,40min]酸化物醇洗,水洗酸化胆红素室温下加10倍量乙醇,使其分散均匀,pH不应高于5,加0.5%抗氧化剂,搅匀放置约1h分层。去上层醇液,收集沉淀胆红素。取醇洗胆红素加50℃温水冲洗,保温约5min,收集漂浮胆红素,迅速加乙醇脱水,除去乙醇得胆红素粗品。


酸化物[乙醇]→[1h]沉淀胆红素[50℃热水]→[乙醇]胆红素粗品提取,蒸发,结晶和干燥取胆红素粗品加10倍氯仿50℃振摇溶解10min。必要时可提取2-3次,残渣为白色即可。将氯仿提取液减压蒸馏近干,出现大部分胆红素结晶,冷至室温后加入乙醇,继续冷却至4℃10min,滤出胆红素结晶,用无水乙醇或乙醚处理后,真空干燥得胆红素精品。


胆红素粗品[氯仿]→[10min]氯仿溶液[结晶]→胆红素精品


方法四、离子交换树脂提取法水解液的制Chemicalbook备取新鲜牛胆汁,纱布过滤,在搅拌下加2mol/L氢氧化钠溶液调pH10,搅拌下煮沸,过滤,得水解液。牛胆汁[NaOH]→[pH10,100℃]水解液树脂柱吸附、洗脱胆酸将煮沸的水解液倒入已预热的树脂柱中,至流出液色变深,吸附饱和为止。加入冷水至柱内温度降至室温,再从柱上端加入稀盐酸亚硫酸氢钠溶液,使流出液pH为1。用75%乙醇洗脱,洗脱液为墨绿色浑浊液时收集,洗脱至流出液变清,pH近中性。再用95%乙醇洗1次。收集的乙醇洗脱液供制备胆酸。水解液[离子交换柱]→[75%乙醇,95%乙醇]乙醇洗脱液洗脱胆红素、浓缩和干燥将柱内95%乙醇全部放出,加氯仿浸泡10min,收集氯仿洗脱液至不显黄色为止。将氯仿洗脱液蒸馏近干,加无水乙醇,继续回收至无氯仿,趁热抽滤,收集胆红素,干燥,得胆红素成品。树脂柱[氯仿]→氯仿洗脱液[蒸发,干燥]→胆红素成品。


方法五、有机溶剂直接萃取法破胆新鲜或冷冻猪胆化冻后,用不锈钢刀破开胆皮,再用一层白的确凉过滤胆汁以除去油脂和杂质,得纯胆汁。猪胆[过滤]→猪胆汁氯仿提取100ml胆汁加0.5ml氯仿,边加边搅拌,加热至50-70℃,加4%氢氧化钠溶液,调pH11-12。再加热至98-100℃,沸腾3min,降温至20-30℃。加亚硫酸氢钠,加氯仿,加盐酸,调pH3-4,分层,上层为水层,中层为杂质和胆酸,下层为胆红素氯仿溶液。猪胆汁[氯仿,4%NaOH]→[100℃,20-30℃][酸化]→胆红素氯仿溶液胆红素成品取胆红素氯仿溶液,加热回收氯仿,温度<80℃。加无水乙醇继续蒸馏至残余氯仿蒸干,抽滤至干,用50-70℃热乙醇洗一次抽干,加乙醚冲洗抽干。放入干燥器或约40℃烤箱干燥,得胆红素成品。胆红素氯仿溶液[浓缩,干燥]→胆红素成品。


方法六、以胆绿素为原料胆绿素还原酶的制备从猪肾中分离纯化制备胆绿素还原酶。猪肾[分离]→胆绿素还原酶胆红素成品的制备将胆绿素用胆绿素还原酶还原,或将胆绿素加抗氧剂处理,制得胆红素成品。胆绿素[胆绿素还原酶]→胆红素成品方法七、以胆汁为原料碱水解量取新鲜胆汁(经双层纱布过滤)1000ml,加少量固体亚硫酸氢钠及5ml氯仿,加热至60-70℃。不断搅拌下冷至50℃时加0.2%的亚硫酸氢钠溶液,加2mol/L氢氧化钠溶液调pH11-12,不断搅拌下加热沸腾3min,降至室温,得碱水解液。新鲜胆汁[NaHSO3,氯仿]→[60-70℃][0.2%NaHSO3]→[50℃][pH11-12]→[沸腾3min][室温]→碱水解液氯仿萃取碱水解液中加0.1%亚硫酸氢钠溶液和30%氯仿。

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