1．性状
本品为白色结晶或结晶性粉末，无臭或略带特殊臭气，有特殊的酸味①。
2．鉴定试验
（1）取本品的水溶液（1→20）1mL装入试管，加间苯二酚2~3mg及硫酸1mL，振荡混合。在120~130℃加热5min，冷却，加水定容至5mL。然后边冷却边滴氢氧化钠溶液（2→5）调成碱性后，再加水定容至10mL时，此液在紫外线下照射发出浅蓝色荧光②。
（2）将本品的水溶液（1→20）装入瓷皿，用氨水中和后，加氨基磺酸10mg，在水浴上加热数分钟后，再加亚硝酸钠溶液（1→5）5mL，略微加热后，用氢氧化钠试液调成碱性时呈红色③。
3．纯度试验
（1）熔点 本品的熔点应是127~130℃④。
（2）溶解性 将本品1g溶于20mL水时，溶液应透明⑤。
（3）氯化物 取本品1g，进行氯化物的常规试验时，其量应在0.01mol/L对应量以下。
（4）重金属 将本品2g溶于40mL水中，加酚酞试液1滴，再滴加氨水至液体呈微红色后，加2mL稀醋酸，以此为检液进行重金属常规试验时，其量应在0.002%以下。
（5）铁 可用“葡萄糖酸内酯”的纯度试验（7）。但试样要用0.25g。
4．强热残留物
本品的强热残留物应在0.05%以下。
5．定量法
精确地称取本品约1.5g，溶解于水中定容至250mL，取25mL，用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定（指示剂：酚酞试液2滴）⑥。
0.1mol/L氢氧化钠溶液1ml=6.1704mg C4H6O5
注 解
①本品极易溶解于水中，也溶于乙醇，但难溶于乙醚。L-苹果酸是细针状结晶体，有强的潮解性，但本品无潮解性。
②是1.2-二羧酸的共同反应，由生成的香兰素衍生物的荧光加以鉴定（→反丁烯二酸③）。
③本品与氨基磺酸重氮化物进行偶合，生成红色色素。
④L-苹果酸的熔点是99~100℃。
⑤对混入的反丁烯二酸进行试验。
⑥本品由于干燥而分解，以原样进行定量。