丹皮酚的测定—高效液相色谱法

仪器设备：
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按丹皮酚峰计算应不低于3000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相：乙腈+水+三乙胺+磷酸=28+72+0.1+0.1
2.2检测波长：274nm
2.3柱温：室温
试样制备： 1. 称取供试品
精密量取本品10ml，为供试品。

2. 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品适量，加乙醇制成每1ml含60mg溶液。

3. 供试品溶液的制备
供试品，置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
 
应用范围
本方法采用高效液相色谱法测定正骨水中丹皮酚的含量。
本方法适用于中成药正骨水。
 
方法原理
本品加乙醇稀释，摇匀，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算出其含量。
 
试剂
1.乙醇
2 .乙腈
3 .三乙胺
4 .磷酸
试样制备
1. 称取供试品
精密量取本品10ml，为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品适量，加乙醇制成每1ml含60mg溶液。
3. 供试品溶液的制备
供试品，置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
 
操作步骤
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ml，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长274nm处测定丹皮酚（C9H10O3）的峰面积，计算出其含量。