甘草次酸的测定—毛细管区带电泳法

仪器设备

仪器设备： 1 仪器
1.1毛细管电泳仪
1.2 毛细管柱：;石英毛细管65cm×75μm i.d. ,有效长50cm
1.3 紫外检测器
2 毛细管电泳条件
2.1 缓冲液：50mmol/l 硼砂溶液
2.2电压：14kv
2.3 检测波长：228nm
2.4重力进样10s (高度7cm)

试样制备：
1.对照品溶液的制备
精密称取甘草次酸化学对照品7. 6mg，置50ml 量瓶中，用50mmol/l硼砂溶液定容至刻度，超声20min作对照品溶液。
2.氢氯噻嗪溶液的制备
精密称取氢氯噻嗪0.2537g ，置250ml 量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,即得。
3. 标准溶液的制备
精密取对照品溶液适量,置10ml量瓶中,加入氢氯噻嗪溶液1. 0ml ,用50mmol/l硼砂溶液(含体积分数10 %甲醇) 定容至刻度，摇匀，配成浓度为0. 0304 、0. 0608 、0. 0912、0. 1216、0.1520 g/l，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4.供试品溶液的制备
精密称取甘草浸膏粉约0. 113g ,置50ml 量瓶中, 另精密加入氢氯噻嗪溶液5. 0ml , 用50mmol/l硼砂溶液(含体积分数10 %甲醇) 定容至刻度，,超声30min，滤过即得。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
 
应用范围
本方法采用毛细管区带电泳法测定甘草浸膏粉里甘草次酸的含量。
本方法适用于中药制剂甘草浸膏粉。
 
方法原理
用毛细管区带电泳法,紫外检测波长228nm ,电压14kv ,以50mmol/l硼砂溶液为背景电解质,氢氯噻嗪为内标,对甘草浸膏粉中的甘草次酸进行定量分析。
 
试剂
1. 硼砂
2. 甘草次酸化学对照品
3. 氢氯噻嗪
 
试样制备
1.对照品溶液的制备
精密称取甘草次酸化学对照品7. 6mg，置50ml 量瓶中，用50mmol/l硼砂溶液定容至刻度，超声20min作对照品溶液。
2.氢氯噻嗪溶液的制备
精密称取氢氯噻嗪0.2537g ，置250ml 量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,即得。
3. 标准溶液的制备
精密取对照品溶液适量,置10ml量瓶中,加入氢氯噻嗪溶液1. 0ml ,用50mmol/l硼砂溶液(含体积分数10 %甲醇) 定容至刻度，摇匀，配成浓度为0. 0304 、0. 0608 、0. 0912、0. 1216、0.1520 g/l，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4.供试品溶液的制备
精密称取甘草浸膏粉约0. 113g ,置50ml 量瓶中, 另精密加入氢氯噻嗪溶液5. 0ml , 用50mmol/l硼砂溶液(含体积分数10 %甲醇) 定容至刻度，,超声30min，滤过即得。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
 
操作步骤
1.标准曲线的绘制
取上述标准溶液在毛细管电泳仪上进样10s，记录电泳图10μL注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定甘草次酸的吸收度，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。
2. 供试品的测定
取上述供试品溶液在毛细管电泳仪上进样10s，用紫外检测器测定甘草次酸的吸收度，计算出其含量。