附录 A
乙基麦芽酚、乙基香兰素含量的测定
A.1 原理
以无水乙醇提取饲料香味剂中乙基香兰素、乙基麦芽酚，提取液过滤膜后用配有氢火焰检测器和5%苯基-甲基聚硅氧烷毛细管气相色谱柱的气相色谱仪测定。
A.2 试剂和溶液
本方法所用试剂和水，未注明其要求时，均指分析纯和符合GB/T 6682中规定的三级水。色谱分析中所用水均为符合GB/T 6682中规定的一级用水。
A.2.1 无水乙醇。
A.2.2 乙基香兰素标准品：含量≥98%。
A.2.3 乙基麦芽酚标准品：含量≥98%。
A.2.4 乙基香兰素标准品溶液：称取乙基香兰素标准品0.1g（精确至0.0001g），置于10mL棕色容量瓶
中，无水乙醇溶解，定容至刻度，摇匀。使乙基香兰素浓度为10mg/mL，2～8℃保质期一个月。
A.2.5 乙基麦芽酚标准品溶液：称取乙基麦芽酚标准品0.1g（精确至0.0001g），置于10mL棕色容量瓶
中，无水乙醇溶解，定容至刻度，摇匀。使乙基麦芽酚浓度为10mg/mL，2～8℃保质期一个月。
A.2.6
A.3 仪器和设备
A.3.1 气相色谱仪：配氢火焰检测器和程序升温的柱温箱。
A.3.2 有机相针式滤器：孔径0.45μm。
A.3.3 分析天平:感量为0.0001g。
A.3.4 实验室常用仪器设备。
A.4 测定
A.4.1 气相色谱参考条件
色谱柱：5﹪苯基-甲基聚硅氧烷毛细管气相色谱柱或同等效果的柱子，30 m×0.25 μm；
进样口温度：240℃
进样方式：不分流进样；
进样体积：1 µL；
载气流速：8.0 mL/min；
柱温箱温度：起始 60 ℃，保持 2min，以 30 ℃/min 的速率升温至 200 ℃，保持 2 min；
检测器温度：260 ℃。
A.4.2 试样溶液的制备
准确称取试样约0.5g （精确至0.0001g），置于10 mL棕色容量瓶中，加5 mL无水乙醇，振荡混匀，用无水乙醇定容至刻度。混匀后静置。取上清溶液，过0.45 µm的微孔滤膜，尽快上机测定。
A.4.3 色谱分析
按气相色谱仪说明书调整仪器操作参数。向气相色谱柱中注入乙基香兰素、乙基麦芽酚标准品溶液及试样溶液， 得到色谱峰面积响应值。
A.4.4 结果计算
试样中乙基麦芽酚、乙基香兰素含量以质量分数X计，数值以（％）表示，按式（A.1）计算：
        A1×C1×10
X=-------------------100...........................(A.1)
           m×A2
式中：
A1 — 试样溶液峰面积值；
C1 — 标准样品的浓度，单位为克每毫升（mg/mL)；
A2 — 标准品溶液峰面积值；
m — 样品的质量，单位为克（mg)；
每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，结果保留三位有效数字。
A.5 允许差
两个平行测定结果相对偏差不大于 5.0％。



1．性状
本品是白~淡黄色的磷片结晶或结晶性粉末，有草香醛样的香味①。
2．鉴定试验
（1）取本品0.1g，加1mL25%盐酸，在水浴上加热5min，冷却后添加过氧化氢试液1mL，充分混合振荡3min，放置生成沉淀后，再加苯2mL，振荡混合，苯层呈天蓝色②。
（2）按“草兰素”的鉴定试验（2）和（3）。
3．纯度试验
（1）熔点  本品的熔点应是76~78℃。
（2）溶解性  将本品1g溶于60V/V%乙醇10mL时，溶液应透明。
4．干燥失重
将本品用于燥器（硫酸）干燥4h，失重应在0.5%以下。
5．强热残留物
本品的强热残留物应在0.05%以下。
6.含量分析
将试样在五氧化磷中干燥4h后，准确称取该试样约300 mg，放人一125 ml圆锥烧瓶中，溶于50ml二甲基甲胺中。加百里酚蓝试液(TS-247)3滴，在磁力搅拌和预防大气中二氧化碳的措施下，用0.1 mol/L甲醇钠进行滴定。同时作空白试验。每Ml 0.1mol/L甲醇钠相当于乙基香兰素(C9H10O3)16.62 mg。
注  解
①本品有类似于草兰素的香味。强度相当于草香醛的2~2.5倍。本品1g溶于100mL水中（50℃），易溶于乙醇、乙醚、氯仿，氢氧化钠等碱溶液中，遇光和空气缓慢氧化。
②在本品中加25%盐酸，即使加热也不能完全溶解，而草兰素在此条件下可完全溶解。冷后，加氧化氢，溶液呈黑褐色，且生成沉淀。向其中加苯溶解，苯层变成美丽的天蓝色。草香醛时，呈钠色，反应机制不明。